一、將小鼠固定好,將尾巴拉直,繃緊
小鼠性情較溫順,一般不會咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠*固定。在一些特殊的實驗中,如進(jìn)行尾靜脈注射時,可使用特殊的固定裝置進(jìn)行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。如要進(jìn)行手術(shù)或心臟采血應(yīng)先行麻醉再操作,如進(jìn)行解剖實驗則必須先行無痛處死后再進(jìn)行。
或者用這個方法
1、小鼠要固定好,自制一個籠子,前面通氣,中間有一個擋板,讓小鼠不能后退,筒子后面開一個口,尾巴從這里出來,這樣固定牢靠
2、注射前尾巴用稍熱的水浸泡幾分鐘,有利于注射
3、先遠(yuǎn)后盡,不要一開始就從尾根部,那樣失敗了不好辦
4、進(jìn)血管后注意保持穩(wěn)定,HAMILTON動物注射進(jìn)樣針針尖很容易刺穿血管的。至于能否穿進(jìn),個人手感如何,全靠自己啦。多練習(xí),一定很快掌握的,不難,不難!練習(xí)10余只小鼠就比較熟練了
二、用酒精棉球擦拭尾巴,使血管擴張
或者用熱水或者熱毛巾焐熱,使靜脈擴張;選用適當(dāng)?shù)?/span>HAMILTON動物注射進(jìn)樣針頭,越細(xì)越好;在尾部較靠近上段的地方注射,這里血管比較大。用酒精或熱水擦拭,擦拭的時候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射狀態(tài)為尾巴發(fā)白,緊靠白色的尾骨兩側(cè)清晰可見兩根紅色靜脈。
三、用左手的食指,中指,無名指及大拇指將小鼠尾巴固定
手法:握住1ml注射器前面0.1ml處。右手小指搭在拽著鼠尾的左手拇指處按此手形進(jìn)針;看針尖前面那個斜面有3/4(關(guān)鍵),如果血管充盈則進(jìn)1/2,進(jìn)入,停,上挑針頭,進(jìn)針;左右輕擺動,如可動,可注射。
原則是:把你*次打進(jìn)的手形,*固定下來,每次都重復(fù)。
四、注射技巧
注射時左手扯尾,使尾巴緊貼桌面,尾巴與桌邊緊貼轉(zhuǎn)彎處為進(jìn)針部位,一般選擇距尾尖1/4或1/3處進(jìn)針,此處皮膚較薄,血管清晰,進(jìn)針容易。進(jìn)針時針頭與桌面平行,針尖稍稍朝下,從中指及無名指與拇指接觸處稍上方進(jìn)針,一旦進(jìn)入,須將針頭稍稍上挑進(jìn)入,針頭沿血管進(jìn)入,肉眼可關(guān)察到針頭前進(jìn)。如果針頭在血管中前進(jìn),可明顯地感覺到針行通暢,毫無阻力。若針頭不在血管中,手感針行有阻力,有一種堵的感覺。進(jìn)針時不要太深,針頭入皮膚后馬上把針頭略往上,平行進(jìn)針,針扎入時有落空感,推液時無阻力則說明成功了!如針頭處出現(xiàn)皮丘則說明在皮下,推出重來。進(jìn)針處在尾巴的1/3-1/2處,甚至可以更下一點。這樣一次失敗了還可以往上再來,不要馬上在zui高處打,因為你們要打這么多天。要為以后作準(zhǔn)備。用熱水、酒精、紅外都可以擴張血管。可以視情況而用。總而言之,zui重要的是“熟能生巧”。你先練習(xí)一下或請高手相助。不然到了zui后幾天,真的很難打的。
注意:HAMILTON動物注射進(jìn)樣針進(jìn)入后,切記手不可發(fā)抖,因為血管壁非常薄,容易扎穿。推藥時,要緩?fù)啤H暨M(jìn)針成功,推藥順暢,無阻力;若推藥時感覺有阻力,說明針頭不在血管中,須及時拔出,重新進(jìn)針。一般選用4號或4號半針頭。用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾靜脈注射并不難,主要是一種感覺。若用上十只鼠練手,你必會找到感覺。心要靜,手要穩(wěn),要有耐心。我研一的時候尾靜脈注射讓我頭疼萬分,越急越打不進(jìn)去。后來靜下心來,邊注射邊找感覺,很快就熟練了。
五、通過看有無回血來測試HAMILTON動物注射進(jìn)樣針是否在靜脈內(nèi)
六、HAMILTON動物注射進(jìn)樣針注射
做到以上步驟,保證注射成功!
七、注意
1、如果做細(xì)胞移植時,應(yīng)該盡量把細(xì)胞打散,不然很容易引起栓塞!
2、練習(xí):建議你先用藍(lán)墨水練手,因為新手往往看不出打入的是皮下還是靜脈
其實真的只能熟能生巧一般推薦在尾下1/3處進(jìn)針,但是1/2處準(zhǔn)確度較好,HAMILTON動物注射進(jìn)樣針針頭可以插深入些,防止意外擺動戳破靜脈而注入皮下,很多時候覺得進(jìn)了血管打的卻是皮下,就是因為這個原因。
或者用:經(jīng)常尾經(jīng)脈注射胎盤蘭,比較容易,靜脈在側(cè)面比較粗的那個,可以做個容器,用一個50ml的離心管前面弄個開口,后面的螺蓋弄個洞,把老鼠裝進(jìn)去,比較容易,把都對準(zhǔn)管小鼠自動進(jìn)去,把尾巴從蓋子的洞穿出來,操作極為方便。刮毛,用熱水燙一下,血管漲起來就可以,具體的感覺還要自己實踐一下掌握,不過還容易,有3-4只就可以掌握。
3、規(guī)律:動物越小越好操作,小鼠比大鼠容易,幼年大鼠比成年大鼠容易;對于小鼠還是尾靜脈注射,這樣損傷zui小;成年大鼠實在不行可以選股靜脈注射,相對要容易一些;zui重要的一點,必須多練,進(jìn)針時的那種感覺必須自己好好體會,熟能生巧,這是常識。